라이n르나 Cat.No.RTL-09098/09099로부터의 첫 번째 가닥 cdna 합성을 위한 라이킨크-RT 히어로티엠 I (그드나스로) 최고 프리믹스

라이킨크-RT 히어로티엠 I (그드나스로)

라이n르나로부터의 첫 번째 가닥 cdna 합성을 위한 최고 프리믹스

Cat.No.RTL-09098/09099

기술 :

라이킨크-RT 히어로티엠 I (그드나스는) 빨리 게놈 dna 오염을 제거하기 위해 특별히 라이n르나를 위해 개발된 반대 전사 시스템입니다. 빨리 효과적으로 큐피크레 결과에 게놈의 간섭을 회피하면서, 5×gDNase 혼합은 2 분 동안 42' Ｃ에 있는 RNA에서 남아있는 게놈을 제거할 수 있습니다.

5×L-RT 히어로티엠 혼합은 특별히 강한 RNA 친근감과 더 높은 역전 현상 리코딩 효율로, 라이n르나와 다른 장기간 RNA 복잡한 템플릿을 위해 특히 역전사 효소의 신형인 포레게네에 의해 개발된 포레게네 라이n르나 역전사 효소를 포함합니다. 최적화된 시스템은 더 빨리 반대 전사율을 만들고, 쉽게 높은 GC함량과 복잡한 이차구조와 RNA 템플릿을 전사할 수 있습니다. 첫번째 스트랜드 cdna 합성은 15 분에 42' Ｃ에 완료될 수 있습니다.

상술 :

25×20μl 르크스스, 50×20μl 르크스스

키트 부속

키트스 성분 정보

- 5×gDNase 혼합 : 그드나 에이전트 제거, RT 반응이 수행되기 (내부 글리세롤 함량이 동결되지 않을지도 모르고 그것이 동결되지 않을지도 모르며, 그것이 정상적 현상에 속합니다) 전에 조작 지시에 따라 시약을 사용하도록 필요합니다.

- 5×L-RT HEROTM 혼합 : 포레게네 라이n르나 역전사 효소를 포함합니다, rnase 저해제, DNTPS, 스타빌리퍼, 개선제, 최적화기, 올리고 (DT) 18개 프라이머).

Features&advantages :

2 분 이내에 템플릿에서 그드나를 제거할 수 있는 그드나를 제거하기 위한 -효율적 능력.

-그것은 효율적으로 라이n르나의 필사를 역으로 돌릴 수 있습니다. 역전사 산물이 큐피크레를 받을 때, Ct 가치는 전통적 역전사 시스템의 그것보다 낮습니다.

-효율적 역전사 시스템, 단지 첫번째 가닥 cdna을 종합을 완료하는데 15 분이 걸립니다.

-복잡한 템플릿 : 높은 GC함량과 복잡한 이차구조와 템플릿은 또한 고효율로 역으로 돌려질 수 있습니다.

-고감도 역전사 시스템, 피그 같은 수준 템플릿은 또한 고품질 상보DNA를 얻을 수 있습니다.

-그 역전사 시스템은 하이 써말 스테빌리티를 가지고 있고 최적 반응 온도는 42C이고 그것이 여전히 50C에 있는 좋은 역전사 성능을 가지고 있습니다.

주형 rna 요구조건

새로운 샘플로부터 추출되거나 -80 'Ｃ에 보존된 RNA를 사용하는 것은 최고입니다.

- 템플릿 완전성 : 좋은 완전성, 어떤 퇴보.

- 템플릿 순도 : RNA에 포함된 IONS, 단백질, EDTA, 에탄올, 페놀과 다른 언론지는 역전사 활성에 영향을 미치고 궁극적으로 역전사 효과에 영향을 미칠 것입니다.

주형 rna 적정량

- 라이n르나를 위해 : 10ng-1 μg 전체 RNA/20 μl 시스템.

- 일반적 RNA에 대해 : 0.1pg-1 μg 전 rna 또는 0.01pg-0.1 μg mRNA/20 μl 시스템.

키트스 성분 정보

- 5×gDNase 혼합 : 그드나 에이전트 제거, RT 반응이 수행되기 (내부 글리세롤 함량이 동결되지 않을지도 모르고 그것이 동결되지 않을지도 모르며, 그것이 정상적 현상에 속합니다) 전에 조작 지시에 따라 시약을 사용하도록 필요합니다.

- 5×L-RT HEROTM 혼합 : 포레게네 라이n르나 역전사 효소를 포함합니다, rnase 저해제, DNTPS, 스타빌리퍼, 개선제, 최적화기, 올리고 (DT_{) 18개} 프라이머).

예방책 : (장비를 사용하기 전에 주의깊게 예방책을 읽으세요)

- 템플릿은 사용하는 새로운 샘플 또는 RNA에게 -80 'Ｃ (RNA 완전성, 어떤 퇴보도 보증하지 않으면서, RNA가 되풀이된 동결-해동을 회피하여야 합니다) 보존되기를 권고합니다.

- RNA 가수분해효소 오염을 회피하기 위해, 실험적 조작은 rnase-프리 우주에서 실행됩니다 ; 건 헤드와 PCR 원심분리기 보장될 것은 rnase-프리 ; 그리고 일회용 장갑과 마스크를 착용하세요.

- 사용하기 전에, 5 × 그드나스 혼합과 5 × L-RT HEROTM 혼합은 계속 위치되고 얼음이 그것을 완전히 녹게 만들고 광 총알이 섞입니다 ; 시스템은 미안하지만, 공식화되고 장비의 성능을 개선하고 장비 PCR 증폭 전문성의 성능을 개선하기 위해 얼음 조에 작용합니다.

- 5 × L-RT HEROTM 혼합은 추가적 추가적 프라이머에 어떠한 프라이머도 추가하지 않고 최적화된 비율 역전사 프라이머를 추가했습니다.

- 이차구조의 복합 rna 템플릿을 위해, 반응 온도는 50 'Ｃ에 증가될 수 있습니다

작업 흐름 :

저장과 판매 수명 :

최고 프리믹스 PCR 장비는 -20' Ｃ에 저장되어야 합니다. 영수증 뒤에 바로 제품을 -20' Ｃ에 있는 일정온도 냉동기에 저장하세요. 만약 저장 조건이 적절하면, 제품이 1년 유효기간 동안 어떠한 성능도 떨어뜨리지 않을 것입니다.

문제 분석 가이드

다음은 당신의 실험에 도움이 되기를 희망하면서, 라이킨크-RT 히어로티엠 I (그드나스로) 일련 장비의 사용 속에 놓일 수 있는 문제의 분석입니다. 게다가 우리는 조작 지시와 질문을 넘어서 기술 지원이 다른 실험적이거나 기술적 문제와 당신을 돕도록 노력했습니다. 만약 당신이 어떠한 필요도 가지고 있다면, 우리와 연락하세요 : 028-83361257 또는 이메일 : Tech@foregene.com.

비특이적 증폭

1. 불합리한 프라이머 디자인

권고 : 프라이머 계산 원칙에 따른 디자인 프라이머.

2. 게놈 잔여물.

제안 : 그드나 이동 반응 온도의 첫 번째 단계가 42' Ｃ이고 반응 시간이 또한 5 분으로 확장될 수 있다는 것을 확인하세요.

어떤 증폭도 RT-큐피크레로 신호를 보내지 않습니다

1. RNA는 떨어뜨려집니다.

권고 : RNA 추출에 쓸 물질은 최대한 신선하고 고품질이고 고청정도 RNA가 사용되어야 합니다.

2. RNA는 억제제를 포함합니다.

권고 : 역전사 억제제는 일반적으로 SDS, 구아니딘염, EDTA, 기타 등등을 포함합니다. 그것은 억제제를 제거하기 위해 70% 에탄올로 RNA 침전물을 씻는다고 추천받습니다.

3. 프라이머 디자인 쟁점.

권고 : 프라이머 디자인 원칙에 따름으로써 점검을 위한 프라이머를 재도안하세요.

타겟 밴드는 공백 대조구에 나타납니다

1. 작동 툴 또는 시약의 오염물.

권고 : 모든 시약 또는 실험을 위한 장비는 고압솥으로 처리되어야 합니다. DNA 표본이 피펫 속으로 빨려들어가거나 원심 분리관에서 뿌려지는 것을 예방하기 위해 취급될 때 주의하고 친절하세요.

2. 오염은 PCR 반응 시스템을 준비하는 동안 발생했습니다.

권고 : 다음과 같이, 핸들링 때 필요한 예방 조치를 취하세요 : 라텍스 장갑을 입으면서, 필터 팁을 사용하기. 오염 견딜수 있는 체계에서 실시간 PCR 혼합을 사용하세요.

3. 프라이머는 떨어뜨려집니다.

제안 : 프라이머가 떨어뜨려지는지 발견하기 위한 SDS-PAGE 전기영동을 사용하고, 형광 검출 실험을 위한 새로운 프라이머로 대체하세요.