타크 dna 폴리머라제와 RT-QPCR 에아사이트텀 (단일 스텝) -택맨 Cat.No.RT-02131/02132

RT-큐피크레 에아사이트텀 (단일 스텝) -택맨 Cat.No.RT-02131/02132 단단계 실시간 타크 dna 폴리머라제와 RT-PCR 마스터 믹스

RT-PCR 에아사이트텀 I (단일 스텝)

Cat.No.RT-02011/02012

단단계 RT-PCR 마스터 믹스

단지 연구 용도를 위해

-20C에 저장하세요

제품 소개

포레게네 단단계 RT-PCR 에아사이트텀 시리즈품은 RNA에서부터 이중 쇄 dna까지 통합된 반응을 실현합니다 즉, 역전사와 PCR 증폭이 실험적 단계를 단순화하는 똑같은 반응 원심 분리관과 똑같은 반응 시스템에 완료되고, 실험 프로그램을 최적화하고, 실험 효율성을 향상시킵니다.

RT-PCR 에아사이트텀 I (단일 스텝)은 RT부터 똑같은 튜브에서 PCR까지 연속작동을 실현하는 포레게네의 특별히 개발된 단단계 RT-PCR 장비입니다. 수술은 단순하고 빠르며, 그것이 효과적으로 실험 동안 오염을 줄일 수 있습니다. 2×RT-PCR 에아사이트텀 혼합은 증폭을 위해 강한 허용한도, 열 안정성, 고효율과 전문성을 가지고 있습니다.

특징

단단계 장비는 역전사와 PCR가 똑같은 튜브에서 실행될 수 있게 합니다. 그것은 단지 주형 rna, 특별한 PCR 프라이머와 rnase-프리 ddH2O를 추가할 필요가 있습니다.

실시간 RNA의 정량 분석은 빨리 그리고 정확하게 실행될 수 있습니다.

장비는 유일한 포레게네 역전사 반응제를 사용하고 포레게네 핫스타 타크 dna 폴리머라제가 효과적으로 반응의 증폭 효율과 전문성을 향상시키기 위해 유일한 반응 시스템과 결합했습니다.

최적화된 반응 시스템은 반응이 더 높은 검출 감도와 더 강한 열 안정성과 더 좋은 허용한도를 가지고 있게 합니다.

제품 품질의 관리

FOREGEN의 전체 품질 경영 시스템 (FOREGENE의 토탈 품질 관리 시스템)에 따르면, RT-PCR 에아사이트텀 I (단일 스텝) 장비의 각각 뱃치는 시험된 타임즈 엄밀하게 각각 장비의 품질, 신뢰성과 안정이 1회분으로 처리한다는 것을 보증할 것입니다 .

키트 콘텐츠

수송과 저장 조건

1.수송 조건

저온 냉장 용기 교통부의 전체 과정, 장비가 보기 흉한 꼴을 하고 있다는 것을 보증하고의 <4>

2. 저장 조건

RT 에아사이트텀 내가 -20' Ｃ에 저장됩니다. 영수증 뒤에 바로 제품을 -20' Ｃ에 있는 일정온도 냉동기에 저장하세요. 만약 저장 조건이 적절하면, 제품이 1년 유효기간 동안 어떠한 성능도 떨어뜨리지 않을 것입니다.

키트 부속 정보

2× RT-PCR 에아사이트텀은 혼합됩니다 :포레게네 역전사 효소, rnase 저해제, 포레게네 핫스타 타크 DNA Polymerase,dNTPs, Mg2+, 반응 버퍼, 최적화기와 안정기, 기타 등등.

예방책 : (장비를 사용하기 전에 주의깊게 예방책을 읽으세요)

템플릿을 위해, 그것은 새로운 샘플로부터 추출된 RNA를 사용하도록 추천되거나 -80C에 저장됩니다 (RNA가 반복 프리징과 해동을 회피하여야 합니다).

RNA 가수분해효소 오염물을 회피하기 위해, 실험 작전은 rnase-프리 우주에서 실행되어야 합니다 ; 사용된 피벳 팁과 PCR 원심 분리관은 있어야 합니다 rnase-프리 ; 그리고 일회용 장갑과 마스크는 입혀져야 합니다. 사용 전에 완전히 녹고, 홱 움직이고 사용하기 전에 다른 사람들과 친하게 지내기 위해 2×RT-PCR 에아사이트텀 혼합에 제동을 거세요 ; 시스템을 준비는 장비의 성능과 PCR 증폭의 전문성을 개선하기 위해 얼음 조에 운영되어야 합니다.

주형 rna 집중

RT-PCR 에아사이트텀 I (단일 스텝) :(0.1pg-1μg 전 rna) /20μl 시스템

장비 애플리케이션

- 이 장비는 고-카피와 저카피 유전자들의 고속 검출을 위해 사용됩니다.

- 그것은 특히 높은 GC함량 또는 복잡한 이차구조와 RNA 템플릿의 고속 검출에 적합합니다.

제품 품질의 관리

FOREGEN의 전체 품질 경영 시스템 (FOREGENE의 토탈 품질 관리 시스템)에 따르면, RT-PCR 에아사이트텀 I (단일 스텝) 장비의 각각 뱃치는 시험된 타임즈 엄밀하게 각각 장비의 품질, 신뢰성과 안정이 1회분으로 처리한다는 것을 보증할 것입니다 .

오퍼레이션 가이드

한 : 재료와 시약을 준비

1. 준비가 되어 있는 RNA 템플릿 (그것이 RNA를 추출하고 정화하기 위해 포레게네 전 rna 격리 키트 시리즈 장비를 사용한다고 추천받습니다), 특이성 프라이머 (10μM)와 관련된 소비재의와 악기로 준비합니다.

기록 : RNA의 완전성을 보증하고 새로운 샘플로부터 추출된 RNA를 사용하려고 하세요.

2. 그것이 자연스럽게 녹게 하기 위해 2× RT-PCR 에아사이트텀 혼합과 rnase-프리 ddH2O를 얼음 조에 두고, 나중에 사용할 수 있도록 다른 사람들과 친하게 지내기 위해 튜브 벽을 튀기세요.

비 : RT-PCR 시스템 준비

2×RT-PCR 에아사이트텀 혼합은 최대 범위에 반응 시스템을 다수 준비에 의해 초래된 운영과 실험 오차 동안 오염을 회피하면서, 사용하도록 편리하고 빠릅니다. 사용할 때, 오직 반응 시스템의 절반의 량만을 (예를 들면, 반응 시스템이 20μl이면, 10μl 2×RT-PCR 에아사이트텀 혼합 용액을 가지고 가세요), 량을 구성하기 위해 RNA 템플릿과 특이성 프라이머의 적절한 양을 추가하고, rnase-프리 ddH2O를 추가하세요. 특별한 RT-PCR 반응 시스템 준비를 위해 테이블 1 아래를 언급하세요.

형식 1 :RT-PCR 시스템 준비

1* : 보통 프라이머의 최종 농도는 더 좋은 결과를 획득하기 위해 0.2-0.25μM입니다. 반응 성능이 가난할 때, 프라이머 농도는 0.1-0.5μM의 사정 거리 안에 조정될 수 있습니다.

기록 : 전향 프라이머와 역방향 프라이머는 타겟 유전자를 위한 특이성 프라이머입니다 ; 50μl 시스템은 비례하여 시약 적정량을 조정하기 위해 미안하지만, 20μl 시스템을 언급합니다.

Ｃ : RT-PCR 반응 프로그램 설치

• 위에서 말한 테이블과 관련하여 RT-PCR 시스템으로 준비한 후, 점잖게 혼합되세요 (당신이 점잖게 불기 위해 피벳 팁을 사용할 수 있습니다 ; 당신은 튜브 벽 또는 튜브 캡위에 흩뿌려진 액체를 수집하고, 나중에 사용할 수 있도록 냉장 용기에 제한을 가하기 위해) 또한 간략하게 vortexer와 원심분리기에 혼합될 수 있습니다.

2. 반응의 온도와 시간에서 설정하기 위해 RT-PCR 반응 프로그램 설치 (표 2)를 언급하세요.

기록 : 2×RT-PCR 에아사이트텀 혼합의 활동을 보증하고 증폭 효율을 향상시키기 위해, 반응 프로그램이 시스템이 준비되는 후에 바로 들어가게 될 수 있도록, PCR 기구 프로그램을 설정한 후 RT-PCR 반응 시스템으로 준비하는 것은 최고입니다.

형식 2 :RT-PCR 반응 시스템 설정

기록 : 참조로서 위에서 말한 절차는 참조로서 뿐입니다. 실제 반응 조건은 복잡한 이차구조와 RNA 템플릿을 위해 템플릿, 프라이머, 기타 등등의 구조적인 조건에 따라 다릅니다, 역전사의 첫 번째 단계를 위한 반응 온도가 50' Ｃ라고 추천받습니다. 특정 동작에, 목표물 프래그먼트 사이즈의 구체 정황과 증폭된 프래그먼트의 기본 시퀀스와 프라이머의 GC함량과 키에 따라 어닐링 온도, 연장 시간, 기타 등등을 포함하여 최적 반응 조건을 설계하는 것이 필요합니다.
RT-PCR 동작도

포레게네 역전사 효소

포레게네 역전사 효소는 대단히 효율적이고 특별한 역전사 반응을 제공할 수 있습니다. 역전사 효소는 고친화도를 나타내고, 여전히 50' Ｃ의 반응 온도에 있는 좋은 역전사 활동을 유지합니다. 그것은 잘 역으로 돌려질 수 있고 다른 역전사 효소가 취급할 수 없는 복잡한 이차구조와 RNA를 전사합니다. 포레게네 역전사 효소는 고감도를 가지고 있고, RNA 양 (0.1pg≤RNA≤1μg)의 넓은 범위에서 적용 가능합니다.

포레게네 핫스타 타크 dna 폴리머라제

PCR의 대단히 특정한 증폭을 제공합니다. 역전사가 진행 중일 때, dna 폴리머라제는 완전히 쓸모 없고, 반대 전사 반응을 저지하지 않습니다. 94' Ｃ로 가열하는 PCR 반응 프로그램 뒤에, dna 폴리머라제는 활성화되고 역전사 효소가 비활성화시킵니다. 높은 전문성과 PCR 증폭의 신뢰성을 보증하면서, 핫 스타트 과정은.

주의 :(장비를 사용하기 전에 주의깊게 예방책을 읽으세요)

- 리에이전트스는 반복 프리징과 해동을 회피하여야 합니다, 그렇지 않았다면 시약의 성능이 감소하거나 무효이게 될 것입니다.

- 그것은 -80C에 저장한 새로운 샘플 추출 또는 주형 rna를 사용한다고 추천받습니다 (RNA가 반복 프리징과 해동을 회피하여야 합니다).

- RNA 가수분해효소 오염물을 회피하기 위해, 실험 작전은 rnase-프리 우주에서 실행되어야 합니다 ; 사용된 피벳 팁과 PCR 튜브는 있어야 합니다 rnase-프리 ; 그리고 일회용 장갑과 마스크는 입혀져야 합니다.

- 이 장비는 실험을 위해 특이성 프라이머와 함께 사용되어야 합니다. 실험의 필요에 따라 확대될 유전자를 위해 특이성 프라이머를 선택하세요.

- 사용 전에 완전히 녹고, 홱 움직이고 사용하기 전에 다른 사람들과 친하게 지내기 위해 2× RT-PCR 에아사이트텀 혼합에 제동을 걸었습니다 ; 시스템을 준비는 장비의 성능과 PCR 증폭의 전문성을 개선하기 위해 얼음 조에 운영되어야 합니다 .