포레게네 주식회사.
중국 FOREGENE, 세계의 FOREGENE!
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| 원래 장소: | 중국 |
| 브랜드 이름: | FOREGENE |
| 인증: | ISO CE |
| 모델 번호: | RT-02111 |
| 최소 주문 수량: | 1 키트 |
|---|---|
| 가격: | 186 usd per kit |
| 포장 세부 사항: | 안전한 트랜스 통으로 포장되기 |
| 배달 시간: | 7 일로 일합니다 |
| 지불 조건: | L/C (신용장), 인수 인도, D/P (지급도 조건), 전신환, 웨스턴 유니온 |
| 공급 능력: | 달 당 10000개 장비 |
| 상품 이름: | 단단계 RT-큐피크레 마스터 믹스 | 애플리케이션: | 큐피크레 반응을 위해 |
|---|---|---|---|
| 포장: | 장비 당 100 르크스스 | MOQ: | 1 키트 |
| 배달 시간: | 7 일로 일합니다 | 브랜드: | FOREGENE |
| OEM 서비스: | 받아들여집니다 | ||
| 하이 라이트: | 단일 스텝 RT 큐피크레 마스터 믹스,OEM 실시간 큐피크레 장비 |
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RT-큐피크레 에아사이트텀 (단일 스텝) -SYBR는 녹색이 됩니다 나
Cat.No.RT-02111/02112
단단계 실시간 RT-PCR 마스터 믹스
단지 연구 용도를 위해
-20C에 저장하세요
효과적으로 RT와 실시간 PCR 반응을 결합시키기 위한 독특한 시스템 RT-큐피크레 에아사이트텀 (단일 스텝) -SYBR 녹색 이우세스, 어느 것이 빠르게 유전자들의 정량적 검출을 완료할 수 있습니까. 제품은 강한 허용한도, 높은 전문성과 안정을 가지고 있습니다. 제품은 보통 taq 효소와 비교해서 더 빠른 증폭 (2Kb/min), 높은 증폭 효율, 강한 특별한 증폭 능력과 낮은 미스매치율을 이점이 있는 회사의 유일한 포레게네 핫스타 타크 dna 폴리머라제를 포함합니다. 그것은 비특이적 증폭을 감소시키고 PCR의 정확도를 향상시키기 위해 실시간 RT-PCR를 위해 여기에서 사용됩니다.
단단계 장비는 주형 rna, 특별한 PCR 프라이머와 rnase-프리 ddH2O를 추가하기 위해 똑같은 튜브, 유일한 필요에서 역전사와 큐피크레 두 반응을 만듭니다.
장비는 빨리 그리고 효율적으로 양적으로 바이러스의 RNA 또는 추적 RNA를 분석할 수 있습니다.
장비는 유일한 포레게네 역전사 반응제를 사용하고 포레게네 핫스타 타크 dna 폴리머라제가 효과적으로 반응의 증폭 효율과 전문성을 향상시키기 위해 유일한 반응 시스템과 결합했습니다.
최적화된 반응 시스템은 반응이 더 높은 검출 감도와 더 강한 열 안정성과 더 좋은 허용한도를 가지고 있게 합니다.
-SYBR 그린 I가 장비를 단 RT-큐피크레 에아사이트텀 (단일 스텝)은 록스 내부 기준 염료가 딸려 있으며, 그것이 고객들이 양적 PCR 기구의 다른 모델들에 사용하기 위한 편리한 웰 사이에 신호 배경과 신호 에러를 제거하는데 사용될 수 있습니다.
| RT-큐피크레 에아사이트텀 (단일 스텝) -SYBR는 녹색이 됩니다 나 | ||
| 키트 콘텐츠 | RT-02111 | RT-02112 |
| 100T (20μl 시스템) | 500T (20μl 시스템) | |
| 2× RT-큐피크레 에아사이트텀 믹스-SYBR | 1 밀리람베르트 | 1.7ml×3 |
| 50× 록스 참고 염료 | 200μl | 1 밀리람베르트 |
| rnase-프리 ddH2O | 1.7 밀리람베르트 | 1.7ml×3 |
| 조작 매뉴얼 | 1개 부분 | 1개 부분 |
1.수송 조건
저온 냉장 용기 교통부의 전체 과정, 장비가 보기 흉한 꼴을 하고 있다는 것을 보증하고의 <4>
2. 저장 조건
2× RT-큐피크레 에아사이트텀 믹스-SYBR :포레게네 역전사 효소와 rnase 저해제, 포레게네 핫스타 타크 dna 폴리머라제, 드트프스의 최적화된 비율, SYBR 그린이, Mg2+, 안정기, 개선제와 최적화기.
록스 참고 염료 :그것은 일반적으로 ABI와 같은 회사의 실시간 PCR 증폭기에 사용되고 PCR 튜브와 튜브 사이의 차이를 조정하기 위한 스트라타진이 PCR 샘플 로딩 에러에 의해 발생되었습니다. 다른 악기에 의해 요구된 록스 참고 염료의 집중은 다르고 사용자가 기구의 적용농도에 따라 그것을 추가할 수 있습니다.
예방책 : (장비를 사용하기 전에 주의깊게 예방책을 읽으세요)
시약은 반복 프리징과 해동을 회피하여야 합니다, 그렇지 않았다면 시약의 성능이 감소하거나 무효이게 될 것입니다.
장비에서 시약은 빛으로부터 보호되어야 하고, -20' Ｃ에 저장했습니다.
그것은 새로운 샘플 추출을 사용한다고 추천받거나 주형 rna가 -80' Ｃ에 저장했습니다 (RNA가 반복 프리징과 해동을 회피하여야 합니다).
미안하지만, RNA 가수분해효소 오염물을 회피하기 위해 실험을 rnase-프리 우주에서 수행합니다 ; 사용된 피벳 팁과 PCR 튜브는 있어야 합니다 rnase-프리 ; 그리고 일회용 장갑과 마스크를 착용하세요.
이 장비는 실험을 위한 특이성 프라이머와 함께 사용되어야 합니다. 실험의 필요에 따라 확대될 유전자를 위해 특이성 프라이머를 선택하세요.
사용 전에 완전히 녹고 홱 움직이기 위해 얼음을 2×RT-qPCR 에아사이트텀 믹스-SYBR I를 착용했고 사용 전에 다른 사람들과 친하게 지내세요 ; 시스템을 준비는 장비와 증가 PCR 증폭의 성능을 개선하기 위해 얼음 조에 운영되어야 합니다 전문성.
2×RT-qPCR 에아사이트텀 믹스-SYBR는 미안하지만, SYBR 초록색 I를 포함하고 강한 빛을 회피합니다.
RT-큐피크레 에아사이트텀 (단일 스텝) -SYBR는 녹색이 됩니다 나 :(0.1pg-100ng 전 rna) /20μl 시스템.
한 : 재료와 시약을 준비
1. 준비가 되어 있는 RNA 템플릿 (그것이 RNA를 추출하고 정화하기 위해 포레게네 전 rna 격리 키트 시리즈 장비를 사용한다고 추천받습니다), 특이성 프라이머 (10μM)와 관련된 소비재의와 악기로 준비합니다.
기록 : RNA의 완전성을 보증하고 새로운 샘플로부터 추출된 RNA를 사용하려고 하세요.
2. 그것이 자연스럽게 녹게 하기 위해 (필요한 경우) 2×RT-qPCR 에아사이트텀 믹스-SYBR와 rnase-프리 ddH2O와 50×ROX 참고 염료에 제동을 걸고, 사용까지 혼합되기 위해 튜브 벽을 튀기세요.
비 :RT-큐피크레 시스템 준비
2× RT-큐피크레 에아사이트텀 믹스-SYBR는 사용하도록 편리하고 빠르고, 운영 동안 오염을 회피하고 실험 오차가 최대 범위에 반응 시스템을 다수 준비에 의해 발생되었습니다. 사용할 때, 오직 반응 시스템의 절반의 량만을 (예를 들면, 반응 시스템이 20μl이면, 10μl 2×RT-qPCR 에아사이트텀 믹스-SYBR 해결책을 가지고 가세요), 량을 구성하기 위해 RNA 템플릿과 특이성 프라이머를 추가하고, rnase-프리 ddH2O를 추가하세요. 특별한 RT-큐피크레 반응 시스템 준비를 위해 테이블 1 아래를 언급하세요
형식 1 :RT-큐피크레 시스템 준비
| RT-큐피크레 시스템 추가 | 양 | 최종 농도 |
| 2× RT-큐피크레 에아사이트텀 믹스-SYBR | 10μl | 1× |
| 전향 프라이머 (10μM) | 0.5μl | 0.2-0.25μM 1* |
| 역방향 프라이머 (10μM) | 0.5μl | 0.2-0.25μM 1* |
| 템플릿(RNA) | Xμl | 0.1pg-100ng |
| 50× 록스 참고 염료 | - | 2* |
| RNase-FreeddH2O | (9-X)μl | |
| 전체 양 | 20μl |
1* : 보통 프라이머의 최종 농도는 더 좋은 결과를 획득하기 위해 0.2-0.25μM입니다. 반응 성능이 가난할 때, 프라이머 농도는 0.1-0.5μM의 사정 거리 안에 조정될 수 있습니다.
기록 : 전향 프라이머와 역방향 프라이머는 타겟 유전자를 위한 특이성 프라이머입니다.
2* : 다른 양적 PCR 기구에 따라 록스 참고 염료의 적절한 최종 농도를 선택하세요. 공통 양적 PCR 기계를 위한 록스 참고 염료의 최적 농도는 다음 표에 나타납니다 :
| 퀀트이타티브 PCR 기구 | 록스 참고 염료 최종 농도 |
| abi 프리즘 7000/7300/7700/7900HT/Step 한 기타 등등. | 5× (i.e.20μl 시스템, 2μl 50×ROX 참고 염료를 추가합니다) |
| ABI 7500,7500 빠른, 스트라타진 Mx3000P와 Mx3005P와 Mx4000, 기타 등등. | 1× (i.e.20μl 시스템, 0.4μl 50×ROX 참고 염료를 추가합니다) |
| 로슈 PCR 기구, 바이오-래드 PCR 기구, 에펜도르프 양적 PCR 기구, 기타 등등. | 어떤 필요도 록스 참고 염료를 추가하지 않습니다 |
Ｃ :RT-큐피크레 반응 시스템 설정
2. 반응의 온도와 시간에서 설정하기 위해 RT-큐피크레 반응 프로그램 설치 (표 2)를 언급하세요.
기록 : 2×RT-qPCR 에아사이트텀 믹스-SYBR의 활동을 보증하고 증폭 효율을 향상시키기 위해, 반응 프로그램이 시스템 준비가 완료되는 후에 바로 들어가게 될 수 있도록, PCR 기구 프로그램을 구축한 후 RT-큐피크레 반응 시스템으로 준비하는 것은 최고입니다 .
3. 최고 큐피크레 영향을 얻기 위해, 경사진 PCR는 다른 템플릿과 다른 프라이머에 대하여 반응 조건을 최적화하는데 사용될 수 있습니다.
기록 : 이 장비에 제공된 포레게네 핫스타 타크 dna 폴리머라제의 확대 온도 범위는 다음과 같습니다 : 60-72C와 최고 확장 온도는 72C입니다.
다음은 RT-큐피크레 반응 조건의 사례입니다. 그것은 PCR 반응을 위한 2단계 건너뛰기법을 이용한다고 추천받습니다. 템플릿 농도가 비특이적 증폭을 야기시키기에 너무 낮을 때, 낮은 프라이머 Tm 가치는 낮은 증폭 효율 또는 가난한 증폭 곡선 반복성, 기타 등등으로 이어집니다, 그것이 PCR 반응을 위한 3 단계 방법을 시도한다고 추천받습니다. RT-큐피크레 반응 조건의 설정을 위해 표 2-1 (2단계 건너뛰기법)과 표 2-2 (3 단계 방법)을 언급하세요.
형식 2-1 :RT-큐피크레 반응 프로그램 설치 (두 단계)
| 단계 | 온도 | 타임즈 지 | 사이클 | 내용 |
| 1 | 42C | 10-30min 1* | 1 | 역전사 |
| 2 | 94-95C | 5 분 | 1 | 변성전 |
| 3 | 94-95C | 10 초 | 30-45 | 사이클 동안 템플릿 변성 |
| 60-65C | 20 초 2* | 가열 냉각 / 확대 |
형식 2-2 :RT-큐피크레 반응 프로그램 설치 (3 단계)
| 단계 | 온도 | 타임즈 지 | 사이클 | 내용 |
| 1 | 42C | 10-30min 1* | 1 | 역전사 |
| 2 | 94-95C | 5 분 | 1 | 변성전 |
| 3 | 94-95C | 10 초 | 30-45 | 사이클 동안 템플릿 변성 |
| 55-65C | 20 초 | 프라이머 어닐링 | ||
| 72C | 20-30sec 2* | 확대 |
1* : 역전사 시간은 실험의 필요에 따라 조정될 수 있습니다. β-액틴과 같은 일반적 내생성 유전자들은 단지 10 분이 필요합니다 ; 특별한 압착 유전자들을 발견하기 위해, 역전사 시간은 적절하게 필요에 따라 확장될 수 있습니다.
2* : 증폭된 타겟 단편의 길이에 따라 특정 시간을 지세요. 포레게네 핫스타 타크 dna 폴리머라제의 증폭 속도는 2kb/min 입니다.
기록 : PCR 반응 조건은 복잡한 이차구조와 RNA 템플릿을 위해 템플릿, 프라이머, 기타 등등의 구조적인 조건에 따라 다릅니다, 그것이 역전사의 첫 번째 단계를 위해 42C를 사용한다고 추천받습니다. 특정 동작에, 연장 시간 어닐링 온도를 포함하는, 타겟 단편의 몸집, 증폭된 프래그먼트의 기본 시퀀스와 프라이머의 GC함량과 키, 기타 등등과 같은 구체 정황에 따라 최적 반응 조건을 설계하는 것은 필요합니다.
담당자: David
전화 번호: +8616602829025
