RT-PCR 에아사이트텀 -1시 2분 단계 Cat.No.RT-02021/02022 두 단계 RT PCR 마스터 믹스 PCR 장비

RT-PCR 에아사이트텀 II (두 단계) Cat.No.RT-02021/02022 이단계 RT-PCR 마스터 믹스 PCR 장비

RT-PCR 에아사이트텀 II (두 단계)

Cat.No.RT-02021/02022

이단계 RT-PCR 마스터 믹스

RT-PCR 에아사이트텀 II (두 단계)

Cat.No.RT-02021/02022

이단계 RT-PCR 마스터 믹스

단지 연구 용도를 위해

-20C에 저장하세요

제품 소개

최적화된 RT 혼합과 PCR 혼합을 제공하면서, RT-PCR 에아사이트텀 II (두 단계)은 똑같은 장비에서 RT 반응과 PCR 반응을 결합시키면서, 이단계 RT-PCR를 위한 모든 시약을 포함합니다. 유일한 RT 혼합은 쉽게 그리고 효율적으로 고품질 첫번째 가닥 cdna를 합성할 수 있습니다. 2× PCR 에아사이트텀 혼합 플러스는 증폭을 효율이 높고 특별하게 합니다. 그 둘의 유기적 결합은 타겟 유전자의 탐지를 더 민감하게 합니다.

특징

실시간 RNA의 정량 분석은 빨리 그리고 정확하게 실행될 수 있습니다.

장비는 유일한 포레게네 역전사 반응제를 사용하고 포레게네 핫스타 타크 dna 폴리머라제가 효과적으로 반응의 증폭 효율과 전문성을 향상시키기 위해 유일한 반응 시스템과 결합했습니다.

최적화된 반응 시스템은 반응이 더 높은 검출 감도와 더 강한 열 안정성과 더 좋은 허용한도를 가지고 있게 합니다.

키트 콘텐츠

수송과 저장 조건

1. 수송 조건

저온 냉장 용기 교통부의 전체 과정, 장비가 보기 흉한 꼴을 하고 있다는 것을 보증하고의 <4>

2. 저장 조건

-20' Ｃ에 저장됩니다. 영수증 뒤에 바로 제품을 -20' Ｃ에 있는 일정온도 냉동기에 저장하세요. 만약 저장 조건이 적절하면, 제품이 1년 유효기간 동안 어떠한 성능도 떨어뜨리지 않을 것입니다.

키트 부속 정보

2× RT 에아사이트텀은 혼합됩니다 :포레게네 역전사 효소, rnase 저해제, 드트프스, 반응 버퍼, 최적화기와 안정기, 기타 등등.

2× PCR 에아사이트텀 혼합 플러스 :포레게네 타크 dna 폴리머라제, 드트프스, Mg2+, 반응 버퍼, 최적화기와 안정기.

예방책 : (장비를 사용하기 전에 주의깊게 예방책을 읽으세요)

시약은 반복 프리징과 해동을 회피하여야 합니다, 그렇지 않았다면 시약의 성능이 감소하거나 무효이게 될 것입니다.

템플릿을 위해, 그것은 새로운 샘플로부터 추출된 RNA를 사용하도록 추천되거나 -80C에 저장됩니다 (RNA가 반복 프리징과 해동을 회피하여야 합니다).

RNA 가수분해효소 오염물을 회피하기 위해, 실험 작전은 rnase-프리 우주에서 실행되어야 합니다 ; 사용된 피벳 팁과 PCR 원심 분리관은 있어야 합니다 rnase-프리 ; 그리고 일회용 장갑과 마스크는 입혀져야 합니다.

이 장비는 실험을 위해 특이성 프라이머와 함께 사용되어야 합니다. 실험의 필요에 따라 확대될 유전자를 위해 특이성 프라이머를 선택하세요.

사용 전에 완전히 녹고 홱 움직이기 위해 얼음을 2×RT 에아사이트텀 혼합과 2×PCR 에아사이트텀 혼합 플러스를 착용했고 사용 전에 다른 사람들과 친하게 지내세요 ; 시스템을 준비는 장비의 성능을 개선하고 PCR 증폭의 전문성을 향상시키기 위해 얼음 조에 운영되어야 합니다.

예방책 : (장비를 사용하기 전에 주의깊게 예방책을 읽으세요)

- 리에이전트스는 반복 프리징과 해동을 회피하여야 합니다, 그렇지 않았다면 시약의 성능이 감소하거나 무효이게 될 것입니다.

- 템플릿을 위해,로부터 뽑아낸 사용 RNA에 대한 추천되 (RNA가 회피하여야 하는 -80C에 있는 샘플 또는 저장되 새롭게 한 것이 있습니다 반복 프리징과 해동).

- RNA 가수분해효소 오염물을 회피하기 위해, 실험 작전은 rnase-프리 우주에서 실행되어야 합니다 ; 사용된 피벳 팁과 PCR 원심 분리관은 있어야 합니다 rnase-프리 ; 그리고 일회용 장갑과 마스크는 입혀져야 합니다.

- 이 장비는 실험을 위해 특이성 프라이머와 함께 사용되어야 합니다. 실험의 필요에 따라 확대될 유전자를 위해 특이성 프라이머를 선택하세요.

- 사용 전에 완전히 녹고, 홱 움직이고 사용하기 전에 다른 사람들과 친하게 지내기 위해 2×RT 에아사이트텀 혼합과 2×PCR 에아사이트텀 혼합 플러스에 제동을 걸었습니다 ; 시스템을 준비는 장비의 성능을 개선하고 PCR 증폭의 전문성을 향상시키기 위해 얼음 조에 운영되어야 합니다.

주형 rna 집중

RT-PCR 에아사이트텀 II (두 단계) :(0.1pg-5μg 전 rna) /20μl 시스템

오퍼레이션 가이드

A-1 :재료와 시약을 준비

1. 준비가 되어 있는 RNA 템플릿 (그것이 RNA를 추출하고 정화하기 위해 포레게네 전 rna 격리 키트 시리즈 장비를 사용한다고 추천받습니다), 특이성 프라이머 (10μM)와 관련된 소비재의와 악기로 준비합니다.

기록 : RNA의 완전성을 보증하고 새로운 샘플로부터 추출된 RNA를 사용하려고 하세요.

2. 그것이 자연스럽게 녹게 하기 위해 얼음 조에 2×RT 에아사이트텀 혼합과 rnase-프리 ddH2O를 두고, 나중에 사용할 수 있도록 다른 사람들과 친하게 지내기 위해 튜브 벽을 튀기세요.

A-2 :RT 시스템 준비

2× RT 에아사이트텀 혼합은 최대 범위에 반응 시스템을 다수 준비에 의해 초래된 운영과 실험 오차 동안 오염을 회피하면서, 사용하도록 편리하고 빠릅니다. 사용할 때, 단지 반응 시스템의 절반의 량을 잡(예를 들면, 반응 시스템이 20μl이면, 10μl 2×RT 에아사이트텀 혼합 용액을 취하세요)과, RNA 템플릿과 역전사 프라이머를 추가하고, 20μl에 량을 구성하기 위해 rnase-프리 ddH2O를 추가하세요. 특별한 RT 반응 시스템 준비는 테이블 1 아래를 언급할 수 있습니다.

형식 1 :RT 시스템 준비

A-3 :RT 반응 프로그램 설치

1. 위에서 말한 테이블과 관련하여 RT 시스템으로 준비한 후, 점잖게 혼합되세요 (당신이 점잖게 불기 위해 피벳 팁을 사용할 수 있습니다 ; 당신은 또한 vortexer에 그것을 섞고 튜브 벽 또는 튜브 캡위에 흩뿌려진 액체를 수집하기 위해 그것을 원심기로 분리할 수 있고, 냉장 용기에 쓰일) 준비가 된 것에 그것을 위치시킵니다.

2. 기타 등등, 반응 온도, 시간을 정하기 위해 RT 반응 프로그램 설치 (표 2)를 언급합니다.

기록 : 혼합의 활동을 보증하고 증폭 효율을 향상시키기 위해, 시스템이 시스템 준비의 완료 뒤에 바로 준비될 수 있도록, 금속욕이 일련 반응 온도 (역전사 온도 42C 또는 50C)에 도달하는 후에 RT 반응 시스템으로 준비하는 것은 최고입니다. 반응 프로그램에 들어가세요. RT 반응은 또한 PCR 기계에서 실행될 수 있습니다.

형식 2 :RT 반응 프로그램 설치

기록 : 랜덤 프라이머를 사용할 때, 반응은 반응의 첫 번째 단계 전에 10 분 동안 25C에 미리 가열되어야 합니다. 참조로서 위에서 말한 절차는 참조로서 뿐입니다. 실제 반응 조건은 복잡한 이차적 결과와 RNA 템플릿을 위해 템플릿, 프라이머, 기타 등등의 구조적인 조건에 따라 다릅니다, 1차 반응 온도가 50C라고 추천받습니다.

1. 주까지 그 때문에 반응 생성물은 직접적으로 후속 시험에서 사용되거나 -20' Ｃ에 저장될 수 있습니다. 장기 저장을 위해, 그것은 반복 프리징을 회피한다고 추천받고 -80' Ｃ에 녹고 있습니다.

비 : PCR 식별 반응

B-1 :PCR 반응 시스템 준비

단계에서 합성된 상보DNA를 사용하고 한 템플릿으로서,와 2×PCR 에아사이트텀 혼합이 게다가 장비에 제공된 채로 PCR 반응을 수행합니다. 게다가 2×PCR 에아사이트텀 혼합을 위치시킵니다, 상보DNA,와 그것이 자연스럽게 녹게 하고, 사용까지 섞기 위한 튜브 벽을 튀기기 위한 얼음 조 위의 rnase-프리 ddH2O. 특별한 PCR 시스템 준비를 위해 테이블 3 아래를 언급하세요.

형식 3 :PCR 반응 시스템 preparation反系配制

1* : 보통 프라이머의 최종 농도는 더 좋은 결과를 획득하기 위해 0.2-0.25μM입니다. 반응 성능이 가난할 때, 프라이머 농도는 0.1-0.5μM의 사정 거리 안에 조정될 수 있습니다.

B-2 :PCR 반응 조건 설정

1. 위에서 말한 테이블과 관련하여 PCR 시스템으로 준비한 후, 점잖게 혼합되세요 (당신이 점잖게 불기 위해 피벳 팁을 사용할 수 있습니다 ; 당신은 또한 vortexer에 그것을 섞고 튜브 벽 또는 튜브 캡위에 흩뿌려진 액체를 수집하기 위해 그것을 원심기로 분리할 수 있고, 냉장 용기에 쓰일) 준비가 된 것에 그것을 위치시킵니다.

2. 반응의 온도와 시간에서 설정하기 위해 PCR 반응 프로그램 설치 (테이블 4)를 언급하세요.

기록 : PCR 혼합의 활동을 보증하고 증폭 효율을 향상시키기 위해, PCR 시스템으로 준비하기 전에 PCR 조건을 PCR 기계로 설정하는 것은 최고입니다.

형식 4 :PCR 반응 조건 설정

1* : 증폭된 타겟 단편의 길이에 따라 특정 시간을 지세요. 포레게네 타크 dna 폴리머라제의 증폭 속도는 2kb/min 입니다.

기록 : PCR 반응 조건은 복잡한 이차구조와 RNA 템플릿을 위해 템플릿, 프라이머, 기타 등등의 구조적인 조건에 따라 다릅니다, 역전사의 첫 번째 단계를 위한 반응 온도가 50' Ｃ이라는 것이 권고됩니다. 특정 동작에, 타겟 단편의 몸집과 증폭된 프래그먼트의 기본 시퀀스와 프라이머의 GC함량과 키와 같은 구체 정황에 따르면, 어닐링 온도, 연장 시간, 기타 등등을 포함하여 최적 반응 조건을 설계하는 것이 필요합니다.

RT-PCR 동작도